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查看: 7255|回复: 7

[基础知识普及] 试剂空白吸光度

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发表于 2015-8-28 17:22:34 | 显示全部楼层 |阅读模式
试剂空白吸光度


试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一。每种试剂都有一定的空白吸光度范围,试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质;如利用Trinder反应为原理的检测试剂会因含酚类物质被氧化为醌而变为红色。碱性磷酸酶、r一谷氨酰转肽酶、淀粉酶等检测试剂会因基质分解出硝基酚或酚基苯胺而变黄。有些试剂久置后变浑浊。这些情况均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等负反应,在放置过程中其试剂空白吸光度会因NADH自行氧化为NAD+而下降。原则上,吸光度上升的反应,其试剂空白吸光度越低越好,不能超过一个高限;相反,吸光度下降的反应,其试剂空白吸光度不能低于一个低限。因此,试剂空白吸光度限值,常作为程序参数输入,如经核查超限,仪器会自动报警,提示更换试剂。需要指出的是,还原型辅酶I(或II)等投料量不足或劣质的原料,往往需要加大用量,才使“表观”吸光度上升,凑合过试剂空白核对的“关”,其后果为如下情况:

1.1 线性范围变窄 现象:高值测不高。原因:生产试剂时有效成分投料量不足;试剂成份稳定性较差。

1.2 灵敏度变低现象:酶促反应速度曲线斜率下降,测定结果有严重系统误差。原因:试剂底物浓度不足。

1.3 低值偏高 现象:试剂空白的变化曲线(吸光度VS时间)明显波动。原因:试剂自身不稳定,自行分解;工具酶纯度不够,杂酶含量超限,导致干扰作用。

发表于 2018-12-21 22:36:23 | 显示全部楼层
这个东西不错 值得分享
已绑定手机
发表于 2019-4-28 11:07:31 | 显示全部楼层
这个知识不错,受教了
发表于 2019-6-4 10:46:50 来自手机 | 显示全部楼层
分析的蛮透的。
已绑定手机
发表于 2020-9-28 21:49:26 | 显示全部楼层
学习了,谢谢分享
发表于 2020-10-19 10:30:47 | 显示全部楼层
正在学习,谢谢楼主

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