对注射器用活塞细胞毒性项目检测有关问题的建议

南国知心

     2010年，国内一些企业生产的一次性使用无菌注射器用活塞产品在医疗器械监督抽验中出现细胞毒性项目不合格。最近，笔者查阅了一次性使用无菌注射器用活塞细胞毒性项目检测的相关标准，主要有YY/T0243—2003《一次性使用无菌注射器用活塞》、GB/T16886.1—2001《医疗器械生物学评价 第1部分:评价与试验》、GB/T16886.5—2003《医疗器械生物学评价 第5部分:体外细胞毒性试验》、GB/T14233.2—2005《医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物学试验方法》等，通过研究细胞毒性项目的试验方法，并与多家医疗器械检验机构的相关人员沟通，发现相关标准及执行存在以下缺陷：

　　一是合格判定指标存在歧义。YY/T0243—2003标准规定，应按GB/T16886.1—2001来评价活塞材料的毒性，试验结果应表明无毒性。根据GB/T16886.1—2001标准，GB/T16886.5描述了细胞毒性试验，但只给出细胞毒性计分及含义，并未给出合格判定指标。GB/T14233.2—2005对GB/T16886标准进行了细化，其《引言》声明：相关产品标准在引用本部分时应注意根据产品应用特性规定适宜的合格判定指标，并且在《细胞毒性试验》一章中注明：一般认为可接受的细胞毒性反应不大于2级。这样的表述使得监管人员对YY/T0243标准“无毒性”的理解产生歧义，即活塞材料的细胞毒性反应究竟是0级，还是不大于2级？不同的监管人员对此有不同的理解。

　　二是不同试验方法的严格程度不尽统一。YY/T0243标准未规定细胞毒性项目的试验方法。GB/T16886.5标准规定，细胞毒性试验的方法分成浸提液试验、直接接触试验、间接接触试验。据笔者所联系的医疗器械检验机构介绍，国内的法定医疗器械检测机构均采用浸提液试验。GB/T14233.2—2005标准规定，浸提液试验可选择四唑盐(MTT)比色法或显微镜观察法中的任一方法进行。但通过对比检测数据发现，显微镜观察法判定的细胞毒性级别明显低于四唑盐(MTT)比色法。实际上，按照GB/T16886.5标准的表述，显微镜观察法仅是一种定性评价的方法，而四唑盐(MTT)比色法是一种定量评价的方法，因而更加客观。

　　三是检测机构现行的合格判定标准无法定依据。据有关医疗器械检验机构介绍，国内法定医疗器械检测机构进行细胞毒性试验时，对四唑盐(MTT)比色法试验相对增殖率0或1级的结果判为合格，对相对增殖率2级的结果，结合细胞形态分析进行综合评价。这种做法符合GB/T14233.2—1993标准规定，但该标准已被GB/T14233.2—2005代替，因而综合评价的做法无法定依据。

　　由于一次性使用无菌注射器用活塞细胞毒性试验相关标准及执行存在上述问题，基层食品药品监管部门对相关企业材料安全性的监管尺度难以把握。当前，国内企业生产一次性使用无菌注射器用活塞均采用天然橡胶和硫磺、交联剂、促进剂、抗氧剂等橡胶助剂，这些原辅材料往往含有一定的有害成分。企业在硫化以后的后续处理只能减少有害成分的残留，而不能完全去除。如果简单化地理解并执行YY/T0243—2003标准“无毒性”的要求，即要求活塞产品必须达到细胞毒性0级，企业在实际生产质量管理中难以持续保证。

　　一次性使用无菌注射器接触药液的时间很短，按照GB/T14233.2标准进行浸提液试验的浸提条件是大大严于临床使用条件的，无论标准规定或医疗器械检测机构的实际把握，“细胞毒性反应达到1级或2级且细胞形态正常、贴壁生长良好”在保证活塞的生物安全性上是可以接受的。当然，对细胞毒性反应级别的判定应采用四唑盐(MTT)比色法等定量的方法进行，力求准确，如果同时出现“细胞形态：皱缩，生长：死亡”的情况，这样的活塞产品实际是有危害的，应判定不合格。

　　鉴于此，建议修订YY/T0243—2003标准3.4.1条，明确规定活塞材料进行生物学评价的项目与适宜的合格判定指标，并在“试验方法”一章中规定相应的试验方法。对细胞毒性项目，建议其合格判定指标确定为“细胞毒性反应不大于2级，且细胞形态正常、贴壁生长良好”，试验方法确定为“按GB/T14233.2—2005细胞毒性试验四唑盐(MTT)比色法进行；细胞毒性反应为2级的，同时进行显微镜观察法试验”。